يازلىق پەن قوللانمىسى: 40 سېلسىيە گرادۇسلۇق ئىسسىقلىق دولقۇنى مولېكۇلا تەجرىبىلىرى بىلەن ئۇچراشقاندا

يېقىندا جۇڭگونىڭ كۆپ قىسىم جايلىرىدا يۇقىرى تېمپېراتۇرا داۋاملاشتى. 24-ئىيۇل كۈنى، شەندۇڭ ئۆلكىلىك مېتېئورولوگىيە كۆزىتىش مەركىزى سېرىق رەڭلىك يۇقىرى تېمپېراتۇرا ئاگاھلاندۇرۇشى چىقىرىپ، ئىچكى رايونلاردا كېيىنكى تۆت كۈندە «ساۋناغا ئوخشاش» تېمپېراتۇرا 35-37 سېلسىيە گرادۇس (111-133 فارېنگېيت) ۋە نەملىك %80 بولىدىغانلىقىنى مۆلچەرلىدى. شىنجاڭنىڭ تۇرپان قاتارلىق جايلىرىدا تېمپېراتۇرا 48 سېلسىيە گرادۇس (111-133 فارېنگېيت) غا يېقىنلىشىۋاتىدۇ. خۇبېينىڭ ۋۇخەن ۋە شياۋگەن شەھەرلىرى قىزغۇچ سېرىق رەڭلىك ئاگاھلاندۇرۇش ئاستىدا بولۇپ، بەزى رايونلاردا تېمپېراتۇرا 37 سېلسىيە گرادۇستىن ئېشىپ كەتتى. بۇ قاتتىق ئىسسىقتا، پىپېتكا يۈزىنىڭ ئاستىدىكى مىكروسكوپ دۇنياسى غەلىتە قالايمىقانچىلىقلارغا دۇچ كېلىۋاتىدۇ - نۇكلېئىك كىسلاتانىڭ مۇقىملىقى، ئېنزىملارنىڭ پائالىيىتى ۋە رېئاگېنتلارنىڭ فىزىكىلىق ھالىتى ئىسسىق دولقۇن تەرىپىدىن جىمجىت بۇرمىلىنىپ كېتىۋاتىدۇ.

نۇكلېئىك كىسلاتانى چىقىرىش ۋاقىت بىلەن مۇسابىقىلىشىشكە ئايلاندى. سىرتقى تېمپېراتۇرا 40 سېلسىيە گرادۇستىن ئاشقاندا، ھەتتا كوندىتسىيونېرنى ئىشلەتكەندىمۇ، مەشغۇلات ئۈستىلىنىڭ تېمپېراتۇرىسى كۆپىنچە 28 سېلسىيە گرادۇستىن يۇقىرى بولىدۇ. بۇ ۋاقىتتا، ئوچۇق جايدا قالدۇرۇلغان RNA ئەۋرىشكىلىرى باھار ۋە كۈزدىكىگە قارىغاندا ئىككى ھەسسە تېز پارچىلىنىدۇ. ماگنىتلىق مارجان چىقىرىشتا، ئېرىتكۈچىنىڭ تېز سۈرئەتتە ئۇچۇپ كېتىشى سەۋەبىدىن، بۇفېر ئېرىتمىسى يەرلىكتە تويۇنۇپ، كىرىستاللار ئاسانلا چۆكۈپ كېتىدۇ. بۇ كىرىستاللار نۇكلېئىك كىسلاتانى تۇتۇش ئۈنۈمىدە چوڭ تەۋرىنىشلەرنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ. ئورگانىك ئېرىتكۈچىلەرنىڭ ئۇچۇپ كېتىشى بىرلا ۋاقىتتا ئاشىدۇ. 30 سېلسىيە گرادۇستا، خلوروفورمنىڭ ئۇچۇپ كېتىش مىقدارى 25 سېلسىيە گرادۇسقا سېلىشتۇرغاندا %40 ئاشىدۇ. مەشغۇلات جەريانىدا، تۈتۈن چىقىرىش ئۈسكۈنىسىدىكى شامال سۈرئىتىنىڭ 0.5m/s بولۇشىغا كاپالەتلىك قىلىش ۋە قوغداش ئۈنۈمىنى ساقلاش ئۈچۈن نىترىل قولقاپ ئىشلىتىش كېرەك.

PCR تەجرىبىلىرى تېخىمۇ مۇرەككەپ تېمپېراتۇرا قالايمىقانچىلىقلىرىغا دۇچ كېلىدۇ. Taq ئېنزىم ۋە تەتۈر ترانسكرىپتازا قاتارلىق رېئاگېنتلار تېمپېراتۇرىنىڭ تۇيۇقسىز ئۆزگىرىشىگە ئىنتايىن سەزگۈر. -20 سېلسىيە گرادۇسلۇق توڭلاتقۇدىن چىقىرىۋېتىلگەندىن كېيىن تۇرۇبا تاملىرىدىكى قويۇقلىشىش رېئاكسىيە سىستېمىسىغا كىرسە، ئېنزىم پائالىيىتىنىڭ %15 تىن ئارتۇق يوقىلىشىغا سەۋەب بولۇشى مۇمكىن. dNTP ئېرىتمىلىرى ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا (>30 سېلسىيە گرادۇس) پەقەت 5 مىنۇت تۇرغاندىن كېيىنلا بايقىغىلى بولىدىغان پارچىلىنىشنى كۆرسىتىدۇ. يۇقىرى تېمپېراتۇرا ئەسۋابلارنىڭ ئىشلىشىگىمۇ توسقۇنلۇق قىلىدۇ. تەجرىبىخانا مۇھىتىنىڭ تېمپېراتۇرىسى >35 سېلسىيە گرادۇس بولغاندا ۋە PCR ئەسۋابىنىڭ ئىسسىقلىق تارقىتىش بوشلۇقى يېتەرلىك بولمىسا (تامدىن <50 سانتىمېتىر)، ئىچكى تېمپېراتۇرا پەرقى 0.8 سېلسىيە گرادۇسقىچە يېتىشى مۇمكىن. بۇ خىل ئۆزگىرىش 96 ئۆڭكۈرلۈك تاختاينىڭ گىرۋىكىدىكى كۈچەيتىش ئۈنۈمىنىڭ %40 تىن ئارتۇق تۆۋەنلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ. چاڭ سۈزگۈچلىرىنى دائىم تازىلاش كېرەك (چاڭ توپلىنىش ئىسسىقلىق تارقىتىش ئۈنۈمىنى %50 تۆۋەنلىتىدۇ)، بىۋاسىتە ھاۋا تەڭشىگۈچ ئىشلىتىشتىن ساقلىنىش كېرەك. بۇنىڭدىن باشقا، PCR تەجرىبىلىرىنى كېچىسى قىلغاندا، PCR ئەسۋابىنى ئەۋرىشكىلەرنى ساقلاش ئۈچۈن «ۋاقىتلىق توڭلاتقۇ» سۈپىتىدە ئىشلىتىشتىن ساقلىنىڭ. 4 سېلسىيە گرادۇستا 2 سائەتتىن ئارتۇق ساقلىغاندا، قىزىتىلغان قاپاق يېپىلغاندىن كېيىن قويۇقلىشىش پەيدا بولۇپ، رېئاكسىيە سىستېمىسىنى سۇيۇلدۇرۇپ، ئەسۋابنىڭ مېتال مودۇللىرىنى چىرىتىۋېتىشى مۇمكىن.

يۇقىرى تېمپېراتۇرا ئاگاھلاندۇرۇشلىرىغا دۇچ كەلگەندە، مولېكۇلا تەجرىبىخانىلىرىمۇ ئاگاھلاندۇرۇش سىگنالى بېرىشى كېرەك. قىممەتلىك RNA ئەۋرىشكىلىرى -80 سېلسىيە گرادۇسلۇق توڭلاتقۇنىڭ ئارقا تەرىپىدە ساقلىنىشى كېرەك، يۇقىرى تېمپېراتۇرا مەزگىللىرىدە كىرىش چەكلەنگەن. -20 سېلسىيە گرادۇسلۇق توڭلاتقۇنىڭ ئىشىكىنى كۈنىگە بەش قېتىمدىن ئارتۇق ئېچىش تېمپېراتۇرا ئۆزگىرىشىنى كۈچەيتىۋېتىدۇ. يۇقىرى ئىسسىقلىق ھاسىل قىلىدىغان ئۈسكۈنىلەرنىڭ ھەر ئىككى تەرىپى ۋە ئارقا تەرىپىدە كەم دېگەندە 50 سانتىمېتىر ئىسسىقلىق تارقىتىش بوشلۇقى بولۇشى كېرەك. بۇنىڭدىن باشقا، تەجرىبە ۋاقتىنى قايتا تەشكىللەش تەۋسىيە قىلىنىدۇ: RNA ئېلىش ۋە qPCR يۈكلەش قاتارلىق تېمپېراتۇرىغا سەزگۈر مەشغۇلاتلار ئۈچۈن ئەتىگەن سائەت 7:00 دىن 10:00 گىچە؛ سانلىق مەلۇمات ئانالىزى قاتارلىق تەجرىبە ئەمەس خىزمەتلەر ئۈچۈن چۈشتىن كېيىن سائەت 1:00 دىن 4:00 گىچە. بۇ ئىستراتېگىيە يۇقىرى تېمپېراتۇرا چوققىلىرىنىڭ مۇھىم باسقۇچلارغا توسقۇنلۇق قىلىشىنىڭ ئۈنۈملۈك ئالدىنى ئالالايدۇ.

ئىسسىق دولقۇن مەزگىلىدە مولېكۇلا تەجرىبىلىرى تېخنىكا ۋە سەۋرچانلىقنىڭ سىنىقىدۇر. يازنىڭ تىنىمسىز قۇياشى ئاستىدا، بەلكىم پىپېتكىنى قويۇپ، ئەسۋابنىڭ تېخىمۇ كۆپ ئىسسىقلىقنى تارقىتىشىغا يول قويۇش ئۈچۈن ئەۋرىشكىلىرىڭىزگە قوشۇمچە بىر قۇتا مۇز قوشۇشنىڭ ۋاقتى كەلگەندۇر. تېمپېراتۇرا ئۆزگىرىشىگە بولغان بۇ خىل ھۆرمەت، يازنىڭ ئىسسىق پەسلىدە ئەڭ قىممەتلىك تەجرىبىخانا سۈپىتىدۇر - ئاخىرىدا، يازنىڭ 40 سېلسىيە گرادۇسلۇق ئىسسىقىدا، ھەتتا مولېكۇلالارمۇ ئېھتىيات بىلەن قوغدىلىدىغان «سۈنئىي قۇتۇپ رايونى» غا موھتاج.