PCR ئانالىزچى مەسىلىنى ھەل قىلىش: دائىم سورايدىغان سوئال ۋە ھەل قىلىش چارىسى

پولىمېرازا زەنجىرسىمان رېئاكسىيەسى (PCR) ئانالىزچىلىرى مولېكۇلا بىئولوگىيىسىدىكى كەم بولسا بولمايدىغان قوراللار بولۇپ ، تەتقىقاتچىلار گېن تەتقىقاتىدىن كلىنىكىلىق دىئاگنوز قويۇشقىچە بولغان قوللىنىشچان پروگراممىلارنىڭ DNA سىنى كېڭەيتەلەيدۇ. قانداقلا بولمىسۇن ، ھەر قانداق مۇرەككەپ ئۈسكۈنىگە ئوخشاش ، PCR ئانالىزچىسى ئۇنىڭ ئىقتىدارىغا تەسىر يەتكۈزىدىغان مەسىلىلەرگە دۇچ كېلىشى مۇمكىن. بۇ ماقالە توغرىسىدا كۆپ ئۇچرايدىغان سوئاللارغا جاۋاب بېرىدۇPCR تەھلىلچىسىمەسىلىلەرنى ھەل قىلىش ۋە ئورتاق مەسىلىلەرنى ئەمەلىي ھەل قىلىش چارىسى بىلەن تەمىنلەيدۇ.

1. مېنىڭ PCR ئىنكاسىم نېمىشقا كۈچەيمەيدۇ؟

ئابونتلار ئەڭ كۆپ ئۇچرايدىغان مەسىلىلەرنىڭ بىرى PCR ئىنكاسىنىڭ نىشان DNA نى كېڭەيتەلمەسلىكى. بۇنى بىر قانچە ئامىلغا باغلاشقا بولىدۇ:

دەسلەپكى لايىھە لايىھىسى توغرا ئەمەس: دەسلەپكى پروگراممىلىرىڭىزنىڭ نىشان تەرتىپىگە ماس كېلىدىغانلىقىنى ۋە ئەڭ ياخشى ئېرىتىش تېمپېراتۇرىسىنىڭ (Tm) بولۇشىغا كاپالەتلىك قىلىڭ. دەسلەپكى لايىھىلەش ئۈچۈن يۇمشاق دېتال قوراللىرىنى ئىشلىتىپ ، ئەھمىيەتسىز باغلىنىشتىن ساقلىنىڭ.

قېلىپنىڭ DNA سى يېتەرلىك ئەمەس: يېتەرلىك مىقداردا قېلىپ DNA ئىشلىتىۋاتقانلىقىڭىزنى تەكشۈرۈپ بېقىڭ. بەك ئاز بولسا ئاجىزلاش ياكى كۈچەيتمەسلىك كېلىپ چىقىدۇ.

ئەۋرىشكىدىكى چەكلىگۈچ: ئەۋرىشكە تەركىبىدىكى بۇلغانمىلار PCR ئىنكاسىنى تورمۇزلىيالايدۇ. DNA نى تازىلاشنى ياكى باشقا ئېلىش ئۇسۇلىنى قوللىنىشنى ئويلاڭ.

ھەل قىلىش چارىسى: دەسلەپكى لايىھەڭىزنى تەكشۈرۈڭ ، قېلىپنىڭ قويۇقلۇقىنى ئاشۇرۇڭ ، ئەۋرىشكىڭىزدە چەكلىگۈچ يوقلىقىغا كاپالەتلىك قىلىڭ.

2. نېمىشقا مېنىڭ PCR مەھسۇلاتىمنىڭ ھەجىمى خاتا؟

ئەگەر PCR مەھسۇلات مىقدارىڭىز مۆلچەردىكىدەك بولمىسا ، ئۇ بەلكىم ئىنكاس شارائىتى ياكى ئىشلىتىلگەن تەركىبلەردە مەسىلە بارلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.

كونكرېت بولمىغان كۈچەيتىش: ئەگەر ئالدىن ئويلىمىغان تور بېكەتكە باغلانسا ، بۇ يۈز بېرىدۇ. BLAST قاتارلىق قورالنى ئىشلىتىپ پىرىمېرلارنىڭ كونكرېتلىقىنى تەكشۈرۈڭ.

تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسى خاتا: ئەگەر تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسى بەك تۆۋەن بولسا ، ئالاھىدە باغلىنىش بولمايدۇ. تەدرىجىي PCR ئارقىلىق تېمپېراتۇرىنى ئەلالاشتۇرۇش.

ھەل قىلىش چارىسى: دەسلەپكى خاسلىقنى جەزملەشتۈرۈڭ ھەمدە قوشۇمچە تېمپېراتۇرىنى ئەلالاشتۇرۇپ PCR مەھسۇلاتلىرىنىڭ توغرىلىق دەرىجىسىنى ئۆستۈرىمىز.

3. مېنىڭ PCR ئانالىزچىم خاتالىق ئۇچۇرىنى كۆرسىتىدۇ. مەن نېمە قىلىشىم كېرەك؟

PCR ئانالىزچىسىدىكى خاتالىق ئۇچۇرى كىشىنى چۆچۈتىدۇ ، ئەمما ئۇلار دائىم يوشۇرۇن مەسىلىلەرنى يىپ ئۇچى بىلەن تەمىنلەيدۇ.

تەڭشەش مەسىلىسى: PCR ئانالىزچىنىڭ توغرا تەڭشىلىشىگە كاپالەتلىك قىلىڭ. قەرەللىك ئاسراش ۋە تەڭشەشنى تەكشۈرۈش توغرا نەتىجىگە ئېرىشىشتە ئىنتايىن مۇھىم.

يۇمشاق دېتال گۇرۇپپىسى: بەزىدە يۇمشاق دېتال كەمتۈكلىرى مەسىلە كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ. كومپيۇتېرىڭىزنى قايتا قوزغىتىپ يۇمشاق دېتال يېڭىلانمىلىرىنى تەكشۈرۈڭ.

ھەل قىلىش چارىسى: كونكرېت خاتالىق كودى ئۈچۈن ئىشلەتكۈچى قوللانمىسىدىن پايدىلىنىڭ ۋە تەۋسىيە قىلىنغان چاتاقلارنى بىر تەرەپ قىلىش باسقۇچلىرىغا ئەگىشىڭ. دائىم ئاسراش نۇرغۇن مەسىلىلەرنىڭ ئالدىنى ئالالايدۇ.

4. نېمىشقا مېنىڭ PCR ئىنكاسىم نەتىجىسى بىردەك بولمايدۇ؟

بىردەك بولمىغان PCR نەتىجىسى كىشىنى ئۈمىدسىزلەندۈرىدۇ:

رېئاكتىپ سۈپىتى: فېرمېنت ، بۇففېر ۋە DNTP قاتارلىق بارلىق رېئاكتورلارنىڭ يېڭى ۋە سۈپەتلىك بولۇشىغا كاپالەتلىك قىلىڭ. ۋاقتى ئۆتكەن ياكى بۇلغانغان رېئاكتور ئۆزگىرىشچانلىقىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىشى مۇمكىن.

ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىتنى تەڭشەش: تېمپېراتۇرانىڭ ماس كەلمەسلىكى PCR جەريانىغا تەسىر كۆرسىتىشى مۇمكىن. ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنىشنىڭ تەڭشىلىشىنى قەرەللىك تەكشۈرۈپ تۇرۇڭ.

ھەل قىلىش چارىسى: ئەلا سۈپەتلىك رېئاكتور ئىشلىتىپ ، ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىتنى قەرەللىك تەڭشەپ ، ئىزچىل نەتىجىگە كاپالەتلىك قىلىڭ.

5. PCR نىڭ ئىنكاس ئۈنۈمىنى قانداق يۇقىرى كۆتۈرۈش كېرەك؟

PCR ئىنكاسىنىڭ ئۈنۈمىنى يۇقىرى كۆتۈرۈش تېخىمۇ يۇقىرى مەھسۇلات ۋە تېخىمۇ ئىشەنچلىك نەتىجىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.

ئىنكاس شارائىتىنى ئەلالاشتۇرۇش: ئوخشىمىغان قويۇقلۇقتىكى پىرىمېر ، قېلىپ DNA ۋە MgCl2 نى ئىشلىتىپ تەجرىبە. ھەر بىر PCR ئىنكاسى ئەڭ ياخشى ئىقتىدار ئۈچۈن ئۆزگىچە شەرتلەرنى تەلەپ قىلىشى مۇمكىن.

يۇقىرى سادىقلىق فېرمېنتى ئىشلىتىڭ: ئەگەر توغرىلىق دەرىجىسى ھالقىلىق بولسا ، يۇقىرى ئىشەنچلىك DNA پولىمېراسىنى ئىشلىتىپ ، كۈچەيتىش جەريانىدا خاتالىقنى ئازايتىشنى ئويلاڭ.

ھەل قىلىش چارىسى: ئەلالاشتۇرۇش تەجرىبىسى ئېلىپ بېرىپ ، PCR تەڭشىكىڭىزنىڭ ئەڭ ياخشى شارائىتىنى تېپىڭ.

خۇلاسە

مەسىلىنى ھەل قىلىش aPCR تەھلىلچىسىبۇ بىر مۈشكۈل ۋەزىپە بولالايدۇ ، ئەمما كۆپ ئۇچرايدىغان مەسىلىلەر ۋە ئۇلارنىڭ ھەل قىلىش چارىلىرىنى چۈشىنىش PCR تەجرىبىڭىزنى كۆرۈنەرلىك يۇقىرى كۆتۈرەلەيدۇ. بۇ كۆپ ئۇچرايدىغان مەسىلىلەرنى ھەل قىلىش ئارقىلىق ، تەتقىقاتچىلار PCR نەتىجىسىنى ياخشىلاپ ، مولېكۇلا بىئولوگىيىسى قوللىنىشتا ئىشەنچلىك نەتىجىگە كاپالەتلىك قىلالايدۇ. قەرەللىك ئاسراش ، رېئاكتورنى ئېھتىياتچانلىق بىلەن تاللاش ۋە ئىنكاس شارائىتىنى ئەلالاشتۇرۇش PCR ئانالىزنىڭ مۇۋەپپەقىيەتلىك بولۇشىنىڭ ئاچقۇچى.