ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنىشنىڭ تەتقىقاتتىكى كۆپ خىللىقى ئۈستىدە ئىزدىنىڭ

ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىتلىرى PCR ماشىنىسى دەپمۇ ئاتىلىدۇ ، مولېكۇلا بىئولوگىيىسى ۋە گېن تەتقىقاتىدىكى مۇھىم قورال. بۇ ئەسۋابلار پولىمېرازا زەنجىرسىمان رېئاكسىيە (PCR) تېخنىكىسى ئارقىلىق DNA ۋە RNA نى كېڭەيتىشكە ئىشلىتىلىدۇ. قانداقلا بولمىسۇن ، ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنىشنىڭ كۆپ خىللىقى PCR قوللىنىشچان پروگراممىلىرى بىلەنلا چەكلەنمەيدۇ. بۇ ماقالىدە ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنىشنىڭ تەتقىقاتتا ئىشلىتىلىدىغان ھەر خىل ئۇسۇللىرى ۋە ئۇلارنىڭ ئىلىم-پەن بىلىملىرىنى ئىلگىرى سۈرۈشتىكى ئەھمىيىتى ئۈستىدە ئىزدىنىمىز.

1. PCR كېڭەيتىش

A نىڭ ئاساسلىق ئىقتىدارىئىسسىقلىق ۋېلىسىپىتPCR كېڭەيتىش ئېلىپ بېرىش ، بۇ ھەر خىل مولېكۇلا بىئولوگىيىلىك قوللىنىشتا ئىنتايىن مۇھىم. بىر قاتار تېمپېراتۇرا ئۆزگىرىشىگە DNA ياكى RNA ئەۋرىشكىسىنى بوي سۇندۇرۇش ئارقىلىق ، ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنگۈچىلەر يادرو كىسلاتاسىنىڭ تارىيىشىنى ، تۇتاشتۇرۇشىنى ۋە كېڭىيىشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ ، نەتىجىدە كونكرېت نىشان تەرتىپىنىڭ كۈچىيىشى مۇمكىن. بۇ جەريان گېن ئانالىزى ، گېن ئىپادىلەش تەتقىقاتى ۋە يۇقۇملۇق ماددىلارنى بايقاشتا ئىنتايىن مۇھىم.

2. مىقدار PCR (qPCR)

ئۆلچەملىك PCR دىن باشقا ، ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىتلىرى مىقدارلاشقان PCR ياكى qPCR ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ ، ئەۋرىشكە تەركىبىدە يادرو كىسلاتا نىشانىنى مىقدارلاشتۇرغىلى بولىدۇ. ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنگۈچىلەر فلۇئورېسسېنسىيە بوياق ياكى تەكشۈرۈش ئەسۋابىنى بىرلەشتۈرۈش ئارقىلىق ، PCR مەھسۇلاتلىرىنىڭ توپلىنىشىنى دەل ۋاقتىدا ئۆلچەپ ، گېننىڭ ئىپادىلىنىش دەرىجىسى ، ۋىرۇس يۈكى ۋە گېننىڭ ئۆزگىرىشى قاتارلىقلارغا قىممەتلىك چۈشەنچە بېرىدۇ.

3. تەتۈر كۆچۈرۈلگەن PCR (RT-PCR)

ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنگۈچىلەر تەتۈر كۆچۈرۈلگەن PCR دا ئىنتايىن مۇھىم رول ئوينايدۇ ، بۇ تېخنىكا RNA نى كېيىنكى كۈچەيتىش ئۈچۈن تولۇقلايدىغان DNA (CDNA) غا ئايلاندۇرىدۇ. بۇ ئۇسۇل گېننىڭ ئىپادىلىنىشى ، RNA ۋىرۇسى ۋە mRNA چاپلاش ئەندىزىسىنى تەتقىق قىلىشتا ئىنتايىن مۇھىم. تېمپېراتۇرىنى ئېنىق كونترول قىلىدىغان ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنىش RT-PCR تەجرىبىسىنىڭ مۇۋەپپەقىيەتلىك بولۇشىدا ئىنتايىن مۇھىم.

4. رەقەملىك PCR

ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت تېخنىكىسىنىڭ تەرەققىي قىلىشى رەقەملىك PCR نىڭ تەرەققىي قىلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى ، بۇ يادرو كىسلاتاسىنى مۇتلەق مىقدارلاشتۇرۇشتىكى ئىنتايىن سەزگۈر ئۇسۇل. PCR ئىنكاسىنى مىڭلىغان يەككە مىكرو رېئاكسىيەلەرگە بۆلۈش ئارقىلىق ، ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنگۈچىلەر نىشان مولېكۇلانىڭ دەسلەپكى قويۇقلۇقىنى توغرا بەلگىلىيەلەيدۇ ، رەقەملىك PCR كەم ئۇچرايدىغان ئۆزگىرىشنى بايقاش ۋە كۆپەيتىلگەن ساننىڭ ئۆزگىرىشىنى ئانالىز قىلىشتىكى قىممەتلىك قورالغا ئايلىنىدۇ.

5. كېيىنكى ئەۋلاد تەرتىپلىك كۈتۈپخانىلارنى تەييارلاش

ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىتلىرى كېيىنكى ئەۋلاد تەرتىپ (NGS) قوللىنىشچان پروگراممىلىرى ئۈچۈن كۈتۈپخانىنى تەييارلاشنىڭ كەم بولسا بولمايدىغان بىر قىسمى. PCR ئاساس قىلىنغان DNA پارچىلىرىنى كېڭەيتىش ئارقىلىق ، ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنگۈچىلەر چەكلىك باشلىنىش ماتېرىيالىدىن تەرتىپلىك كۈتۈپخانىلارنى قۇرالايدۇ ، تەتقىقاتچىلار بىر جانلىقنىڭ پۈتكۈل گېن ، خاتىرىلەنگەن ياكى ئېپىگېنوملىرىنى تەھلىل قىلالايدۇ.

6. ئاقسىل قۇرۇلۇشى ۋە Mutagenesis

ئىسسىقلىق كىسلاتاسىنى كۈچەيتىشتىن باشقا ، ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىتلىرى ئاقسىل قۇرۇلۇشى ۋە مۇتاگېنېز تەتقىقاتىدا ئىشلىتىلىدۇ. بېكەتكە يۈزلەنگەن ئۆزگىرىشچان ئاقسىل ، ئاقسىلنىڭ ئىپادىسىنى ئەلالاشتۇرۇش ۋە يۆنىلىشلىك تەدرىجىي تەرەققىيات تەجرىبىسى ھەمىشە PCR نى ئاساس قىلغان تېخنىكىلارغا تايىنىدۇ ، تېمپېراتۇرىنى كونترول قىلىش ۋە ئىسسىقلىق بىلەن سوۋۇتۇش نىسبىتى بىر قەدەر يۇقىرى بولغان ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنگۈچىلەر توغرا ۋە كۆپەيتىش نەتىجىسىنى قولغا كەلتۈرۈشتە ئىنتايىن مۇھىم.

7. مۇھىت ۋە يېمەكلىك بىخەتەرلىكىنى سىناش

ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنىش مۇھىت ۋە يېمەكلىك بىخەتەرلىكىنى سىناشتا ئىشلىتىلىدۇ ، بولۇپمۇ مىكروب كېسەللىك قوزغاتقۇچى ، گېنى ئۆزگەرتىلگەن جانلىقلار (GMO) ۋە يېمەكلىكتىن پەيدا بولغان كېسەللىك قوزغاتقۇچىنى بايقاش. PCR نى ئاساس قىلغان سىناقلار ۋېلىسىپىت مىنگۈچىلەردە ئېلىپ بېرىلىدىغان بولۇپ ، بۇلغىمىلارنى تېز ۋە كونكرېت پەرقلەندۈرۈش ئىمكانىيىتىگە ئىگە قىلىپ ، يېمەكلىك ۋە مۇھىت ئەۋرىشكىسىنىڭ بىخەتەرلىكى ۋە سۈپىتىگە كاپالەتلىك قىلىدۇ.

يىغىپ ئېيتقاندا ،ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنىشمولېكۇلا بىئولوگىيىسى ۋە گېنولوگىيە تەتقىقاتىدىكى كەم بولسا بولمايدىغان قوراللار بولۇپ ، ئەنئەنىۋى PCR كېڭەيتىشتىن ھالقىپ نۇرغۇن قوللىنىشچان پروگراممىلارنى تەمىنلەيدۇ. ئۇلارنىڭ كۆپ خىللىقى ۋە ئېنىقلىقى ئۇلارنى گېن ئىپادىلەش ئانالىزىدىن تارتىپ مۇھىتنى نازارەت قىلىشقىچە بولغان سىناقلار ئۈچۈن ئىنتايىن مۇھىم قىلىدۇ. تېخنىكىنىڭ داۋاملىق تەرەققىي قىلىشىغا ئەگىشىپ ، ئىسسىقلىق ۋېلىسىپىت مىنگۈچىلەر ئىلمىي بايقاش ۋە يېڭىلىق يارىتىشنى ئىلگىرى سۈرۈشتە كۈنسېرى مۇھىم رول ئوينايدۇ.